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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞小鼠棕色脂肪細(xì)胞
小鼠棕色脂肪細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

小鼠棕色脂肪細(xì)胞的相關(guān)*:豬補(bǔ)體片斷5b(C5b)免疫試劑盒*直銷
豬補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒*直銷

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-28
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:450
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號GOY-01X1311
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠棕色脂肪細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1311

商品介紹:

名稱    小鼠棕色脂肪細(xì)胞   

2.組織來源:脂肪組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

小鼠棕色脂肪細(xì)胞分離自棕色脂肪組織;動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負(fù)責(zé)儲存多余熱量;棕色脂肪負(fù)責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪,將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點是組織中有豐富的毛細(xì)血管,脂肪細(xì)胞內(nèi)散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細(xì)胞中央,這種脂肪細(xì)胞也稱為多泡脂肪細(xì)胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。最終,動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細(xì)胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色(棕色)脂肪細(xì)胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達(dá)到,此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質(zhì)泡,富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細(xì)胞,在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪,作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠棕色脂肪細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠棕色脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M213

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 EDEM2 / C20orf31 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 TALLA-1 / TSPAN7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 MMGT1 / EMC5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 SEZ6L2 / PSK-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 TMED4 / ERS25 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 DBH / Dopamine beta-Hydroxylase 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 BPIFB1 / LPLUNC1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠棕色脂肪細(xì)胞 AR,99.0%4-溴-2-三氟酚 99%Anti-IGF II/IGF2  胰島素樣生長因子-II抗體

SP4-芐氧基-3-氯苯酸 98%Anti-IMP3/IGF-IIBP3  胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體

99.98%,powder,粒徑:10±5μm5-基-2-氟苯酸 97%Anti-IGSF8/CD316  球蛋超家族成員8抗體

99.99%,granular4-羧基苯酸 97%Anti-IKK alpha  KB抑制蛋白激α抗體

水質(zhì)鎘標(biāo)樣 0.1mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品 2-氯-4-氟苯酸 98%Anti-IKK beta  KB抑制蛋白激β抗體

AR,powder,粒徑:10±5μm2-羧基苯酸 97%Anti-IKK gamma   KB抑制蛋白激γ抗體

99.999%,granular2-氯-4-茴香酸 95%Anti-IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗體

2--6-甲基吡 98%5-氯-2-氟苯酸 97%Anti-phospho-IkB beta (Ser23)  化KB抑制蛋白β抗體

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