細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

2BS細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持2BS細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含2BS細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于2BS細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                            445 mL

特級胎牛血清                                             50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)pcr檢測試劑盒

Rat caspase 9 (Casp-9) ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒

HumanProteinSELISAKit 人蛋白S(ProteinS)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG試劑盒雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousefreefattyacids,FFAELISAKit小鼠游離脂肪酸(FFA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒 ，英文名： LIF ELISA Kit

Opioid receptor in mouse beta (beta -EPR) ELISA Kit 小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒

ELISA 小鼠(mouse Fibrinogen) 分裝

CLIAKitforIrna(HumanImmuneRNA)ELISAKit人免疫核糖核酸

通用型動(dòng)物細(xì)胞周期(G1/S和G2/M期)同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

ELISAKitTNF-β大鼠腫瘤壞死因子β

小鼠3(VD3)試劑盒

小鼠2(VD2)試劑盒

小鼠(VD)試劑盒

小鼠C(VC)試劑盒

β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶3抗體

跨膜蛋白111抗體

C2重組人 C2 / Complement Component 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

抗增生抗體靶分子1(TAPA1)重組蛋白 Recombinant Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1)

NTF3重組人 NTF3 / Neurotrophin 3 蛋白 Protein

CEACAM5 Protein Human 重組人 CEACAM5 / CD66e 蛋白

HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/H

2BS 細(xì)胞專用培養(yǎng)基抗增生抗體靶分子1(TAPA1)重組蛋白 Recombinant Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1)

CEACAM5 Protein Human 重組人 CEACAM5 / CD66e 蛋白

C2重組人 C2 / Complement Component 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

NTF3重組人 NTF3 / Neurotrophin 3 蛋白 Protein